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Tecniche di diagnosi e analisi molecolari 2 (Anno Accademico 2014/2015)

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DIAGNOSTICS AND MOLECULAR ANALYSIS TECHNIQUES 2

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Anno accademico 2014/2015

Codice dell'attività didattica
AGR0134
Docente
Davide Carmelo SPADARO (Affidamento interno)
Insegnamento integrato
Crediti/Valenza
4
SSD dell'attività didattica
AGR/12 - patologia vegetale
Modalità di erogazione
Tradizionale
Lingua di insegnamento
Italiano
Modalità di frequenza
Facoltativa
Tipologia d'esame
Orale
Prerequisiti
Nessuno / None
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Sommario insegnamento

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Obiettivi formativi

Acquisire le basi teoriche e pratiche di alcune tra le principali tecniche molecolari per la diagnosi in campo agrario. Possedere una solida preparazione di base indispensabile per proseguire gli studi universitari.

To acquire the theoretical and practical basis of some of the most used molecular techniques for the diagnosis in agriculture. To have a solid background necessary to continue the University studies.

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Risultati dell'apprendimento attesi

Il corso si propone di fornire conoscenze teoriche e pratiche sulle principali tecniche di biologia molecolare applicate al campo agrario.

The course intends to provide theoretical and practical knowlege on the principal molecular biology techniques applied in agriculture.

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Modalità di verifica dell'apprendimento

Durante il corso, al termine della trattazione di ogni argomento sarà organizzata una discussione comune sul tema. Le esercitazioni pratiche rappresenteranno un'ulteriore occasione di verifica dell'apprendimento.

During classes, at the end of the presentation of each topic, a discussion section will be organized. Practicals will be a further occasion to evaluate the level of learning.

Esame orale

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Programma

L’area tematica di riferimento è l’Area della difesa, individuata dagli insegnamenti necessari per acquisire conoscenze nel settore dell'entomologia e della patologia vegetale.

 

Caratteristiche principali di funghi, batteri e virus fitopatogeni

Diagnostica fitopatologica

Osservazione dei sintomi

Isolamento di funghi

Identificazione al microscopio di funghi fitopatogeni

Tecniche immunologiche (ELISA, lateral flow)

Tecniche basate su proteine (isoenzimi, SDS-PAGE, PAGE nativa, Western blot, 2-D elettroforesi)

Tecniche basate sul DNA (cariotipo elettroforetico, RFLP, ibridazione di sonde, Southern blot, PCR, geni ribosomali, ITS, IGS, RAPD, AFLP, trasposoni, ISSR)

Estrazione di DNA da funghi

PCR classica

Elettroforesi su gel di agarosio

Estrazione di RNA

Retrotrascrizione di RNA a cDNA

Real time PCR

Cenni di bioinformatica (blast, allineamento di sequenze, costruzione di alberi filogenetici, metodi di annotazione, analisi di proteine)

Clonaggio di geni, Primer degenerati, gene walking, sequenza genomica e di cDNA, presenza di introni, sequenza proteica, espressione di geni in E.coli e in Pichia pastoris

Sequenziamento di genomi, analisi trascrittomica (microarray e RNA seq)

Applicazioni nanotecnologiche: nanosensori e lab on a chip

 

Main features of phytopathogenic fungi, bacteria and viruses

Phytopathological diagnostics

Symptom observation

Fungal isolation

Microscope identification of phytopathogenic fungi

Immunological techniques (ELISA, lateral flow)

Protein techniques (isoenzymes, SDS-PAGE, native PAGE, Western blot, 2-D electrophoresis)

DNA techniques (caryotyping, RFLP, probe hybridization, Southern blot, PCR, ribosomal genes,  ITS, IGS, RAPD, AFLP, transposons, ISSR)

DNA extraction from fungi

PCR and electrophoresis on agarose gel

RNA extraction, retrotranscription

Real time PCR

Bioinformatics (blast, sequence alignment, dendrograms, gene annotation, protein analysis)

Gene cloning, degenerate primers, gene walking, genomic and cDNA sequence, intron presence, protein sequence, expression in Escherichia coli and in Pichia pastoris

Genome sequencing, transcriptomics (microarray and RNA seq)

Nanotechnological applications: nanosensors and lab on a chip

Caratteristiche principali di funghi, batteri e virus fitopatogeni

Diagnostica fitopatologica: tecniche immunologiche, analisi di proteine e di acidi nucleici.

Cenni di bioinformatica

Genomics and transcriptomics

Applicazioni nanotecnologiche

Main features of phytopathogenic fungi, bacteria and viruses

Phytopathological diagnostics: immunological techniques, analysis of proteins and nucleic acids.

Elements of bioinformatics

Genomics and transcriptomics

Nanotechnological applications

Testi consigliati e bibliografia

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Note

Il docente fornirà materiale didattico inerente gli argomenti trattati a lezione e durante le esercitazioni pratiche.

The teacher will provide educational material concerning the topics of the lessons and the practical activities.

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Ultimo aggiornamento: 24/03/2015 16:48
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